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細胞培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)是一種常用的實驗室技術,其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規(guī)模哺乳動物細胞培養(yǎng)被廣泛用于生物技術中,特別是用于生產疫苗,蛋白質,酶,抗體和激素。細胞培養(yǎng)還用于許多研究*域,特別是在制藥*域,其中將細胞用作研究許多疾病(例如癌癥或心臟病)的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證,基于細胞的測定法(用于高通量篩選),通透性測定法和治療性蛋白質的生產。還培養(yǎng)植物細胞以研究生物學過程,進行遺傳研究或產生次級產物,例如重組蛋白。

一個人可以生長從組織中分離的細胞(原代細胞),也可以使用已建立的永生化細胞系中的細胞。原代細胞(除非它們源自腫瘤組織)僅具有有限的壽命,而永生化的細胞系可以無限期增殖。還可以將原代細胞與永生化細胞系融合以產生雜交瘤。該技術用于產生單克隆抗體。干細胞在醫(yī)學和研究中的使用正變得越來越流行。

細胞以懸浮液或貼壁培養(yǎng)物(單層)的形式在特定的生長培養(yǎng)基中生長。必須針對所用細胞的類型專門選擇培養(yǎng)基。細胞培養(yǎng)基通常包含氨基酸,葡萄糖,維生素,無機鹽,脂質,并可能包含動物血清,生長因子,激素,抗生素,抗氧化劑和其他成分。培養(yǎng)基的類型包括基于血清,無血清,無動物,無蛋白質或化學成分。可以添加補充劑,例如小牛血清。為了維持細胞生長的適當條件,使用培養(yǎng)箱,例如特定的溫度和氣體混合物(對于哺乳動物細胞,通常為37°C,5%CO 2)。

為了保持細胞健康和成長,它們需要有足夠的營養(yǎng),因此需要定期補充培養(yǎng)基。此外,當貼壁細胞系達到融合狀態(tài)(覆蓋所有可用表面積)時,需要對其進行繼代培養(yǎng)以繼續(xù)生長。為了防止細胞污染,必須格外小心。污染可以是化學的(由于化學物質,水或用于制備培養(yǎng)基或塑料的添加劑的污染)或生物的(細菌,霉菌,酵母,支原體,病毒,原生動物等)。
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